Фармакопея. Издание XIV. Том I. Введение, Общие положения, Методы анализа лекарственных средств. Реактивы

C. albicans ) и 1:100000 ( E. coli, S. abony , P. aeruginosa, S. aureus ) до концентрации около 10 4 КОЕ/мл. Взвесь спор B.subtilis также разводят до концентрации 10 4 КОЕ в 1 мл. Культуру A. brasiliensis со скошенного агара Сабуро с глюкозой или со среды № 2 смывают 0,9 % раствором натрия хлорида с 0,05 % раствором твина-80. Определяют количество конидий в 1 мл смыва, используя камеру Горяева или чашечный агаровый метод, и разводят до концентрации 10 4 конидий в 1 мл. 3.2. Подготовка образца для определения антимикробного действия К образцу ЛС добавляют подходящий разбавитель для получения разведения 1:10. В качестве разбавителя используют, как правило, фосфатный буферный раствор с натрия хлоридом и пептоном (рН 7,0), нейтрализующую жидкость или буферный раствор, содержащий не более 5 % твина-80. Из разведения 1:10 готовят последовательные разведения 1:50, 1:100, 1:500, 1:1000 и т.д. 3.3. Методы определения антимикробного действия Испытание на наличие антимикробного действия проводят одним из описанных ниже методов. 3.3.1. Определение антимикробного действия в условиях испытания на микробиологическую чистоту Каждое разведение испытуемого препарата в количестве 1 мл вносят в 6 чашек Петри диаметром 90 мм, в 2 из которых прибавляют по 0,2 мл взвеси B. cereus (или спор B .subtilis ), в 2 другие – по 0,2 мл рабочей взвеси культуры C. albicans , в 2 последние – 0,2 мл взвеси конидий A. brasiliensis. Чашки с бактериями заливают 10 – 15 мл расплавленного и охлажденного до (42,5 ± 2,5) о С соево-казеинового агара или среды № 1, чашки с культурами грибов – тем же количеством агара Сабуро или среды № 2. По 1,0 мл каждого разведения препарата вносят в пробирки с 10 мл жидких сред – бульона Мосселя (бульона Мак-Конки, среды №3) и соево- 1140