Фармакопея. Издание XIV. Том I. Введение, Общие положения, Методы анализа лекарственных средств. Реактивы

Расчет активности испытуемого образца графическим методом. По исправленным значениям диаметров зон d 1 ; d 2 ; d 4 ; d 5 для всех концентраций растворов стандартного образца С 1 ; C 2 ; С 4 ; C 5 и общей средней величине диаметров зон для контрольной концентрации d 3 вычисляют с использовани- ем метода наименьших квадратов размеры зон D min и D mах для низкой и вы- сокой концентраций растворов стандартного образца: D min = (3 d 1 + 2 d 2 + d 3 – d 5 )/5; D max = (3 d 5 + 2 d 4 + d 3 – d 1 )/5, по которым затем строят стандартную кривую на полулогарифмической сет- ке расчета биологической активности антибиотиков, откладывая на оси абс- цисс величины зон, на оси ординат − соответствующие им концентрации рас- творов стандартного образца. Разность между найденными средними вели- чинами зон угнетения роста тест–микроба раствором испытуемого образца и раствором контрольной концентрации стандартного образца из тех же чашек прибавляют к значению величины зоны, соответствующей контрольной кон- центрации на кривой ( D 3 ). Затем по кривой находят концентрацию, соответ- ствующую найденной величине зоны. Умножением полученной концентра- ции на степень разведения получают активность в 1 мл основного раствора или в 1 мг испытуемого образца. Пример . Средний размер зон для раствора испытуемого образца при разведении 1:300 составляет 18,7 мм, средний размер зон для раствора стан- дартного образца, содержащего 2 мкг/мл (контрольная концентрация) из тех же чашек, – 18,5 мм. Следовательно, разность составляет +0,2 мм. Эту раз- ность прибавляют к величине зоны для раствора в концентрации 2 мкг/мл по стандартной кривой, которая равна D 3 = 18,6 мм, и получают величину 18,8 мм. Находят на кривой концентрацию, соответствующую данному размеру зоны — 2,36 мкг/мл. Эту величину умножают на степень разведения и полу- чают содержание активного вещества в 1 мл основного раствора, т. е. 2,36 мкг/мл × 300= 708 мкг/мг. Так как концентрация основного раствора составляла 1 мг/мл, то ак- тивность испытуемого образца равна 708 мкг/мл: 1 мг/мл = 708 мкг/мл. Определение активности испытуемого образца расчетным путем . 1288