Фармакопея. Издание XIV. Том I. Введение, Общие положения, Методы анализа лекарственных средств. Реактивы

реакции от начальной концентрации субстрата, и по этой кривой выбрать насыщающую концентрацию кофактора. После выбора насыщающей концентрации кофактора необходимо проверить, сохраняется ли при ней линейная зависимость [ P ] от t . Конкретные параметры ферментативной реакции указываются в фармакопейных статьях. Способы детекции Для количественной регистрации скорости ферментативной реакции используют спектрофотометрические, флюресцентные, хеми- и биолюминесцентные методы детекции, основанные на спектральных свойствах субстрата или продукта реакции, а также детекцию с помощью микрокалориметрических датчиков и биодатчиков (биосенсоров) на основе хеми- и биолюминесценции; электрохимические методы, такие как потенциометрия, амперометрия и др. Для одних видов анализа детекция может проводиться непрерывно в ходе реакции, для других – после ее остановки. Способ остановки ферментативной реакции должен быть указан в фармакопейной статье. Единицы измерения ферментативной активности Активность фермента измеряется количеством субстрата, преобразованного в продукт в единицу времени, и выражается в Международных единицах (МЕ) или единицах действия (ЕД). МЕ – это такое количество фермента, которое при заданных условиях катализирует превращение одного микромоля субстрата за 1 мин (или одного микроэквивалента затронутых реакцией групп в тех случаях, когда атакуется более одной группы в каждой молекуле субстрата). ЕД – это условная единица активности фермента, величина которой указывается в фармакопейной статье. 1332