Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

2. Референс-аллерген – стандартный образец аллергена из пыльцы амброзии. 3. Референс-сыворотка – сыворотка крови от пациентов с амброзийным поллинозом, имеющая уровень специфических IgE-антител, соответствующий 4 классу. 4. Положительный контроль − аллергенспецифические сыворотки от пациентов с аллергическими заболеваниями, имеющие уровень специфических IgE-антител к исследуемому аллергену, соответствующий 3 − 4 классам. 5. Отрицательный контроль – сыворотка крови, не содержащая аллергенспецифических IgE-антител; также используется для разведения референс-сыворотки. 6. 0,05 М буферный раствор натрия карбоната – буферный раствор для сорбции. 7. Система тетраметилбензидин (ТМБ) – субстрат пероксидазы. 8. Конъюгат – мышиные моноклональные антитела к IgЕ человека, меченные пероксидазой, концентрированные. 9. Разводящий и промывающий раствор – фосфатно-солевой буферный раствор с твином 20 концентрированный (рН 7,1 − 7,3). 10. Стоп-реагент – 10 % раствор серной кислоты. 11. Вода очишенная. ОБОРУДОВАНИЕ 1. Многоканальный фотометр вертикального сканирования для 96- луночных планшетов с длиной волны 450 нм. 2. Термостат (37 ± 1) 0 С. 3. Холодильник (8 ± 1) 0 С. 4. Автоматические или электронные дозаторы с переменным объемом (от 50 до 5000 мкл). 5. Прозрачные разборные 96-луночные планшеты с высокими сорбционными свойствами. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАСТВОРОВ 1) 0,01 М буферный раствор натрия карбоната (рН 9,5). Смешивают 2 мл 0,05М раствора натрия карбоната с 8 мл воды очищенной. Полученный раствор используют на один планшет для ИФА. Хранят при температуре (8 ± 1) 0 С в течение 1 сут. 2) Раствор тетраметилбензидина (ТМБ). Смешивают 2,5 мл ТМБ пероксидазы субстрата с 2,5 мл раствора В пероксидазы субстрата (расходуют на один планшет для ИФА). Раствор готовят за 10 мин до внесения в планшет (хранению не подлежит). 3) Приготовление рабочих растворов реагентов (растворы №№ 1-2, растворы референс-сыворотки) – приведено в табл.1. 3027