Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

6. В каждую лунку планшета вносят по 100 мкл рабочего раствора № 2 (конъюгат) и помещают в термостат при температуре (37 ± 1) °С на 1 ч. 7. Отмывку планшета проводят согласно п. 5, повторив процедуру не менее 5 раз. 8. Во все лунки планшета вносят по 50 мкл раствора ТМБ. Планшет помещают в тёмное место и выдерживают в течение 15 − 20 мин при температуре (23 ± 2) °С. 9. Реакцию останавливают добавлением по 25 мкл стоп-реагента во все лунки и проводят учет результатов. В лунках, где прошла реакция, появится окрашивание разной степени интенсивности. Лунки первого ряда (контроль конъюгата) должны оставаться неокрашенными. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Учёт результатов проводят фотометрически при длине волны 450 нм в в течение 10 мин после остановки реакции. Вычисляют средние арифметические показателей оптической плотности (ОП) одноимённых лунок. Критерии приемлемости результатов: − среднее значение показателей ОП в лунках с контролем конъюгата (КК) не превышает 0,10 (визуально окрашивания лунок не видно); − среднее значение показателей ОП в лунках с референс- сывороткой без разведения (А) больше 1,0, но меньше 2,5; − соотношение средних показателей ОП с разведениями референс- сыворотки (растворы А, B, C, D) следующие: ОП раствора А > ОП раствора В > ОП раствора С > ОП раствора D; − среднее значение показателей ОП раствора D в 1,5 − 2,0 раза больше среднего значения показателей ОП отрицательного контроля. Рассчитывают уровень специфических IgE-антител в аллергенспецифических сыворотках (положительный контроль) (табл. 2). 3030