Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

3. Концентрат ×10 трис-буфера. Стабилен в течение 1 мес при температуре от 2 до 8°С. Перед употреблением разводят стерильной водой для инъекций в соотношении 1:10. Дополнительные реактивы: 1. Международный стандартный образец − раствор концентрата фактора свертывания VIII человека (NIBSC, Eur.Pharm.Ref.Std. BRP H 0920000) или плазма, откалиброванная по международному стандарту фактора VIII. 2. Контрольная нормальная или патологическая плазма, откалиброванная по международному стандарту фактора VIII. 3. 0,9% раствор натрия хлорида. 4. 20% уксусная кислота или 2% лимонная кислота (используются в методике конечной точки накопления хромогена). 5. Вода лабораторная деионизованная MillyQ. Оборудование: 1. Пластиковые пробирки; 2. Микропланшеты; 3. Термостат 37 о С; 4. Спектрофотометр 405 нм или ридер микропланшет 405 нм; 5. Калиброванные пипетки; 6. Вортекс; 7. Секундомер. Исследуемый образец перед определением разводят до ожидаемой активности 1 МЕ/мл. Определение можно проводить в кинетическом режиме и по конечной точке, в пробирках (макрометод) и в микропланшетах (микрометод). Калибровка При проведении каждого определения проводят построение калибровочной кривой. Разведение стандартного образца готовят в 2 этапа: предварительное разведение до активности 1 − 2 МЕ/мл и конечные 3146