Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

и инкубируют с определенным количеством комплемента морских свинок (20 СН 50 ); затем добавляют сенсибилизированные эритроциты барана и определяют количество несвязавшегося комплемента. Подготовка 5% суспензии эритроцитов барана. Эритроциты барана отделяют центрифугированием соответствующего объема стабилизированной крови барана в течение 5 мин при 3000 об/мин (1000 g). Осадок эритроцитов промывают не менее трех раз 10-кратным (к объему эритроцитов) объемом буферного раствора до получения бесцветной промывной жидкости. Отбирают определенный объем отмытых эритроцитов и смешивают с рассчитанным количеством буферного раствора для получения 5% суспензии (о/о). Плотность клеточной суспензии определяют следующим образом: 0,2 мл полученной суспензии эритроцитов прибавляют к 2,8 мл воды очищенной, перемешивают, центрифугируют полученный раствор в течение 5 мин при 3000 об/мин и измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 541 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм (раствор сравнения – вода очищенная). Суспензия пригодна для испытания, если измеренная оптическая плотность супернатанта составляет 0,62±0,01. Корректируют плотность суспензии до указанного показателя добавлением необходимого количества отмытых эритроцитов, если оптическая плотность ниже 0,61, либо рассчитанным по формуле (1) количеством буферного раствора, если оптическая плотность выше 0,63: V БР = (V Н ∙А/0,62)–V Н , где: V БР – добавочный объем буферного раствора, мл; V Н – начальный объем суспензии, мл; А – значение оптической плотности исходной суспензии; 0,62 – целевое значение оптической плотности. Титрование гемолитической сыворотки Готовят серию разведений гемолитической сыворотки, в соответствии с табл.1 (значения разведений гемолитической сыворотки могут быть изменены). 3172