Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

Таблица 1 - Порядок приготовления разведений гемолитической сыворотки Разведение гемолитической сыворотки Используемые растворы Объем буферного раствора, мл Гемолитическая сыворотка Разведение Объем, мл 1:50 4,9 Без разведения 0,1 1:100 1,0 1:50 1,0 1:250 4,0 1:50 1,0 1:500 2,0 1:250 2,0 1:1000 2,0 1:500 2,0 1:2000 1,5 1:1000 1,5 1:3000 2,0 1:1000 1,0 1:4000 1,0 1:2000 1,0 Далее из каждой пробирки с полученными разведениями гемолитической сыворотки переносят по 1,0 мл в новые пробирки, добавляют по 1,0 мл 5% суспензии эритроцитов и осторожно перемешивают. Пробы инкубируют при температуре 37±0,5 ° С в течение 30 мин. По окончании инкубации по 0,2 мл каждой из этих инкубированных проб переносят в новые пробирки, прибавляют по 1,1 мл буферного раствора и по 0,2 мл предварительно приготовленного раствора комплемента (например, разведение 1:150). Испытание выполняют в двух повторностях. Для приготовления контрольных проб без гемолиза в три пробирки вносят по 1,4 мл буферного раствора и по 0,1 мл 5% суспензии эритроцитов. Для приготовления контрольных проб с полным гемолизом в три пробирки вносят по 1,4 мл воды очищенной и по 0,1 мл 5% суспензии эритроцитов. Пробы инкубируют в термостате при температуре 37±0,5 ° С в течение 60 мин, затем охлаждают 10 мин при температуре 5±3 ° С и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. Определяют оптическую плотность надосадочной жидкости на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 541 нм. 3173