Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

Титрование комплемента Готовят исходное разведение комплемента (например, 1:250) с помощью буферного раствора, затем из него готовят ряд разведений в двух повторностях в соответствии с табл. 2: Таблица 2 - Порядок приготовления разведений комплемента Номера пробирок Объем разведения комплемента (например, 1:250), мл Объем буферного раствора, мл 1 0,1 1,2 2 0,2 1,1 3 0,3 1,0 4 0,4 0,9 5 0,5 0,8 6 0,6 0,7 7 0,7 0,6 8 0,8 0,5 9 0,9 0,4 10 1,0 0,3 11 1,1 0,2 12 1,2 0,1 Для приготовления контрольных проб без гемолиза в три пробирки вносят по 1,3 мл буферного раствора. Для приготовления контрольных проб с полным гемолизом в три пробирки вносят по 1,3 мл воды очищенной. Затем в каждую пробирку (с разведениями комплемента пробирки 1-12 и контрольными пробами) добавляют по 0,2 мл гемолитической системы (состоит из суспензии эритроцитов барана и гемолитической сыворотки), тщательно перемешивают и инкубируют в термостате при температуре 37±0,5 ° С в течение 60 мин; затем охлаждают 10 мин при температуре 5±3 ° С и центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 мин. 3175