Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

спектрофотометрическим методом путем измерения величины поглощения при 260 нм. Величина поглощения раствора двойной кольцевой ДНК в концентра- ции 50 мкг/мл составляет 1 (удельное поглощение 200). Содержание ДНК в концентрации менее 500 нг/мл определяется после инкубирования с флуорес- центным красителем, который избирательно связывается с двойной кольцевой ДНК и использованием стандартного образца ДНК для построения калибро- вочной кривой. Для определения плазмидной ДНК также может быть исполь- зована жидкостная хроматография с применением стандартного образца. В не- которых случаях используется капиллярный электрофорез. Должно быть указано допустимое содержание плазмиды в суперскручен- ной конформации (предпочтительно – более 80 %). Для количественного опре- деления суперскрученных форм может быть использована высокоэффективная анионообменная жидкостная хроматография или капиллярный электрофорез. Капиллярный электрофорез также пригоден для количественного определения других форм. Для вирусного вектора должна быть указана концентрация ин- фекционных частиц. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Высокоэф- фективная жидкостная хроматография» и «Капиллярный электрофорез». Подлинность. Испытания проводят с использованием стандартных об- разцов с помощью: рестриктазного анализа (если его возможности позволяют выявить возможные критические модификации в плазмиде и подтвердить ее подлинность), полимеразной цепной реакции, секвенированием нуклеотидной последовательности плазмиды/вектора. Выбор методов оценки подлинности должен быть обоснован и указан в фармакопейной статье или нормативной до- кументации на субстанцию или при установлении требований к конечному балку. Если на одной производственной площадке производят различные ДНК вакцины, метод оценки подлинности должен быть способен однозначно иден- тифицировать каждую производимую плазмиду/вектор в присутствии осталь- ных. Специфическая активность . Оценивается эффективность трансфекции in vitro по транскрипции/трансляции кодируемых генов или in vivo по иммуно- 2665