Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

Раздел 1. Специфическая активность Противовирусную активность интерферона определяют путем сравне- ния защитного действия испытуемого препарата (ИП) с аналогичным дей- ствием стандартного образца активности интерферона (СО). Проведение испытания Определение специфической активности препаратов интерферона про- водят на монослое культур клеток, полученном при температуре (37±1) 0 С в атмосфере с (5,0±0,5) % СО 2 в лунках 96-луночных плоскодонных культу- ральных планшетов. Количество клеток, вносимых в каждую лунку планшета, должно быть достаточным для дальнейшего экспоненциального роста клеточной культуры и образования полноценного монослоя при вышеуказанных условиях культи- вирования в течение 24-48 ч. Готовят серию разведений испытуемого препарата в среде для разведе- ний интерферона с содержанием 2 – 5 % сыворотки (на 4 разведения выше и ниже предполагаемого титра активности). Параллельно готовят такие же раз- ведения СО в среде для разведения интерферона. Рабочие разведения ИП и СО должны быть указаны в нормативной документации. Из лунок планшетов с клеточным монослоем удаляют ростовую среду и вносят приготовленные разведения ИП и соответствующего СО, используя на каждое разведение не менее 4-х лунок с культурой клеток. Возможно внесение ИП и СО в лунки планшета до внесения культуры клеток. В этом случае клеточный монослой будет формироваться с внесён- ным интерфероном. Для контроля дозы индикаторного вируса оставляют 16 лунок с куль- турой клеток, а для контроля состояния монослоя клеток – 4 лунки. В эти 20 лунок вносят поддерживающую среду. 96-луночные планшеты с культурой клеток, разведениями ИП и СО инкубируют в течение 24-48 ч при температуре (37±1) 0 С в атмосфере с 2743