Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

р − число лунок, давших гибель (+) в разведении, ниже которого про- изошла 100 % гибель клеток, и последующих разведениях. После установления активности вируса производят подсчёт дозы для последующего внесения в лунки с испытуемым препаратом (100 ТЦД 50 ). Одновременно с внесением вируса-индикатора осуществляют контроль взятой дозы вируса на 16-ти лунках с культурой клеток (по 4 лунки на каждое разведение вируса). Вносят вирус, начиная с разведения, соответствующего 100 ТЦД 50 , и до разведения, соответствующего 0,1 ТЦД 50 с коэффициентом разведения равным 10. Лунки с культурой клеток для оценки состояния монослоя клеток остаются интактными. После внесения индикаторного вируса в дозе 100 ТЦД 50 96-луночный планшет инкубируют в течение 24-48 ч при температуре (37±1) 0 С в атмосфере с (5,0±0,5) % СО 2 до появления первых признаков цитопатических изменений в клеточном монослое с индикаторным вирусом в дозе 1 ТЦД 50 . Монослой в лун- ках с 0,1 ТЦД 50 индикаторного вируса должен соответствовать состоянию клеток в контрольных лунках. Учёт активности интерферона осуществляют через 24-48 ч при выполне- нии следующих условий: • доза внесённого вируса соответствует 100 ТЦД 50 ; • в лунках с клетками и минимальными концентрациями ИП и СО, зара- женными индикаторным вирусом, наблюдается практически полный ци- топатический эффект (80 − 100 %); • в лунках с контролем клеток отсутствуют признаки дегенерации. Учёт активности интерферона осуществляют визуально или инструмен- тально. 2745