Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

Проведение испытания Определение подлинности препаратов интерферона проводят на моно- слое культур клеток. Количество клеток, вносимых в каждую лунку 96-луночных культу- ральных планшетов, должно быть достаточным для дальнейшего экспонен- циального роста клеточной культуры и образования полноценного монослоя в условиях культивирования при температуре (37±1) 0 С в атмосфере с (5,0±0,5) % СО 2 в течение 24-48 ч. Готовят рабочие дозы ИП и СО. Для этого их разводят средой для раз- ведения интерферона с содержанием 2 – 5 % сыворотки до одной десятой титра противовирусной активности (раздел «Специфическая активность»). Нейтрализующие антитела разводят средой для разведения до концен- траций, указанных в нормативной документации. Для приготовления нейтрализованной смеси подготовленные разведе- ния антител объединяют в равных объемах с рабочими дозами ИП и СО. По- лученную смесь инкубируют при температуре (37±1) о С в атмосфере с (5,0±0,5) % СО 2 в течение 1 ч. Из лунок 96-луночного планшета с монослоем культуры клеток удаля- ют ростовую среду, вносят в лунки планшета нейтрализованную смесь, не менее чем по 4 лунки на каждое разведение антител. Нейтрализованную смесь допустимо вносить в лунки 96-луночного планшета как до внесения культуры клеток, так и после него. Для оценки качества монослоя клеток в процессе постановки реакции нейтрализации (контроль) оставляют не менее 4 лунок, в которые не вносят нейтрализованную смесь. В этих лунках заменяют ростовую среду на под- держивающую. Для контроля защитного действия интерферона также оставляют по 4 лунки на рабочие разведения СО и ИП без нейтрализующих антител. 2748