Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

По истечении 28 сут всем иммунизированным животным вводят под кожу внутренней поверхности верхней трети бедра по (50 ± 10) LD 50 столбнячного токсина в объеме 0,5 мл. Опыт сопровождают контролем величины LD 50 столбнячного токсина. Для этого неиммунизированным мышам из той же партии, разделенным на 3 группы (не менее 4 мышей в каждой группе), вводят столбнячный токсин в дозах 0,5, 1 и 2 LD 50. За иммунизированными животными и животными контрольной группы наблюдают 4 сут, регистрируя число выживших мышей без явлений столбняка. На основании полученных результатов производят расчет иммуногенной активности столбнячного анатоксина с помощью статистических программ, включающих Probit analysis, или по формуле Кербера, определяя величины ED 50 для референс-препарата и испытуемой вакцины. Также рассчитывают количество LD 50 токсина, введенного иммунизированным животным. Формула Кербера: − для испытуемого образца и референс-препарата: lg ED 50 = lg D N – σ ( Σ Li–0,5), − для токсина: Lg LD 50 = lg D N – σ ( Σ Li–0,5), где: D N − величина максимальной из испытуемых доз; σ − логарифм кратности разведения (отношение большей дозы к следующей за ней меньшей дозе); Li – отношение количества выживших мышей без явлений столбняка (для LD 50 – павших) к общему числу животных, получивших данную дозу; Σ Li – сумма значений Li, найденных для всех испытуемых доз. Испытание считается проведенным правильно, если: 2757