Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

(определение LD 50 культуры) из этой же партии животных формируют 4 группы по 10 мышей в каждой. Необходимо соблюдать принцип случайного распределения животных по группам, случайными должны быть и расположение клеток на полках, и порядок введения разрешающей дозы. Иммунизация мышей Готовят по 3 пятикратных разведения испытуемого и референс- препаратов. В качестве растворителя используют 0,9 % раствор натрия хлорида, рН (7,1 ± 0,2). В интервале используемых разведений каждого образца должна содержаться средняя эффективная доза ЕD 50 . В ампулу с референс-препаратом вносят стерильный растворитель из такого расчета, чтобы в 1 мл содержалась 1 МЕ (разведение I). Из разведения I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме (табл. 1). Таблица 1– Пример разведения референс-препарата Разведение Объем вносимого разведения I референс- препарата, мл Объем вносимого растворителя, мл Разведения референс- препарата (в 0,5 мл) Иммунизирующая доза– 0,5мл Количество исходного референс- препарата, мл Количество МЕ I 15 0 1:60 0,0167 0,5 II 2,5 10,0 1:300 0,0033 0,1 III 0,5 12,0 1:1500 0,00066 0,02 Образец испытуемой вакцины разводят в 14 раз (разведение I). Из разведения I делают 2 последующих пятикратных разведения по схеме (табл. 2). Если полученное в опыте значение ЕD 50 испытуемой вакцины будет больше значений использованных доз, необходимо изменить разведение I (например, 1:10). Последующие 2 разведения делают по вышеприведенной схеме. Приготовленные разведения вакцины и референс-препарата хранят при температуре от 2 до 8 ºС и используют в течение не более 4 ч. Таблица 2 – Пример разведения испытуемой вакцины 2764