Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

Разведение Объем вно- симого I разведения вакцины, мл Объем вносимого растворите ля, мл Кратность разведений исходной вакцины (в 0,5 мл) Иммунизирующая доза в объеме 0,5 мл Количество исходной вакцины, мл Количество МЕ (предполага емое содержание) I 14 0 1:28 0,0357 0,5 II 2,5 10,0 1:140 0,0071 0,1 III 0,5 12,0 1:700 0,00142 0,02 Каждой мыши в каждой группе внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл одного из разведений испытуемой вакцины или референс-препарата. К моменту введения заражающей дозы не менее 94 % иммунизированных мышей должно остаться в живых и без признаков заболевания. Если гибель животных превышает указанную величину, то опыт не подлежит учету. Приготовление заражающей суспензии тест-штамма B. рertussis 18323 Бактериальную суспензию B. pertussis 18323, используемую для заражения, готовят из 20 − 24-часовой культуры второго–третьего пассажа, выращенной на среде Борде-Жангу, с кровью человека или КУА с кровью человека или на других, адаптированных к коклюшному микробу средах. Выросшую культуру контролируют путем микроскопии мазков, окрашенных по Граму. Микробные клетки B. рertussis 18323 должны быть морфологически однородны. Посторонняя микрофлора должна отсутствовать. Готовят бактериальную суспензию микробных клеток с концентрацией, соответствующей 10 МЕ по стандартному образцу мутности (разведение 1 А ). Все дальнейшие разведения микробной суспензии делают в 1% растворе гидролизата казеина, содержащего 0,6% раствор натрия хлорида, рН (7,1±0,2). Полученную суспензию разводят последовательно так, чтобы получить заражающую дозу, содержащую 100000 микробных клеток (рабочая суспензия) в объеме 0,03 мл (100–1000 LD 50 ) . Из рабочей суспензии готовят 2765