Фармакопея. Издание XIV. Том II. Формы лекарственных средств, Лекарственное растительное сырьё, Радиофармацевтические/Генотерапевтические/Биологические/Гомеопатические лекарственные препараты и методы их анализа

– подсчет клеток производить с объективом 8× (10×), реже 40×. С иммерсионным объективом работать нельзя. Подсчет клеток на мембранных фильтрах Этот метод рекомендуется использовать для определения количества микроорганизмов во взвесях с низкой концентрацией клеток. Определенный объем исследуемой суспензии фильтруют через мембранный фильтр с нанесенной сеткой. Размер пор фильтра 0,22 или 0,45 мкм. Затем микроорганизмы на фильтре окрашивают карболовым эритрозином и подсчитывают в 20 полях зрения с помощью микроскопа, оснащенного окулярным микрометром. Расчет общего количества микроорганизмов ( x ) в 1 мл производят по формуле: = ∙ ∙10 6 ∙ ’ где: S –фильтрующая площадь (мм 2 ); 10 6 – переводной коэффициент квадратных миллиметров в квадратные микрометры; N – среднее количество бактерий в одном квадрате; s – площадь квадрата окулярного микрометра, мкм 2 ; V– объем профильтрованной жидкости, мл. При подсчете клеток на мембранных фильтрах с помощью люминесцентного микроскопа используют нелюминесцирующие фильтры. После концентрирования клеток на их поверхности проводят флюорохромирование акридиновым оранжевым и подсчитывают. Этот метод позволяет подсчитать общее количество микроорганизмов и определить среди них количество жизнеспособных клеток, так как при окрашивании акридиновыми красителями жизнеспособные клетки имеют зеленую, а нежизнеспособные − красную окраску. Методы непрямого определения концентрации клеток микроорганизмов К непрямым методам определения концентрации клеток 2790