Фармакопея. Издание XIV. Том III. Лекарственные средства синтетического и минерального происхождения

Коэффициент наномолярной экстинкции п -нитроанилина ( K , л∙нмоль -1 ∙см -1 ) вычисляют по формуле: = 405 ∙ 138,12 ∙ 100 ∙ 100 ∙ ∙ 1 000 000 000 где A 405 − оптическая плотность раствора п -нитроанилина при длине волны 405 нм; а − а – навеска нитроанилина, мг; 138,12 − молекулярная масса нитроанилина; 100, 100 − разведение навески нитроанилина; P − дополнительное разведение раствора п -нитроанилина (если применялось); 1 000 000 000 − пересчёт моль в наномоль. Испытуемый раствор. Около 20,0 мг (точная навеска) субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 0,1 М трис- гидрохлорид буферном растворе pH 7,8 и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Раствор субстрата. 100 мг (точная навеска) гидрохлорида БАПНА растворяют при 35±2 °С в 10 мл диметилсульфоксида. При хранении при температуре от 2 до 10 °С раствор пригоден для использования в течение 3 суток Проведение анализа. В три опытные пробирки вместимостью 10 мл и три контрольные пробирки вносят по 4,6 мл 0,1 М трис-гидрохлорида буферного раствора pH 7,8. В контрольные пробирки прибавляют 1 мл 0,5 М уксусной кислоты, перемешивают и прибавляют 0,2 мл испытуемого раствора. В опытные пробирки прибавляют по 0,2 мл испытуемого раствора. Все пробирки термостатируют в течение 5 мин при 25,0±0,5 °С. Во все пробирки в определённом порядке с интервалом 30 с прибавляют по 0,2 мл раствора субстрата и продолжают термостатирование при 25,0±0,5 °С в течение 900 с. Для остановки реакции, во все опытные пробирки в том же порядке с интервалом в 30 с прибавляют по 1,0 мл 4945