Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

ния заполняют камеру Горяева и через 5 – 10 мин с помощью микроскопа с фазово-контрастным устройством (объектив 40 × , окуляр 7 × ) подсчитывают количество спор в 10 больших квадратах сетки. Число спор (ОК) в 1 ампуле (1 мл) исходной вакцины определяют по формуле: ОК = 25000 ∙ . n ∙ p , где: n – количество спор в 10 больших квадратах; p – кратность разведения; 25000 – постоянная величина для камеры данного типа. 2. Количество живых спор. Количество живых спор должно составлять не менее 40 % от общей концентрации. В исследованиях используют агар Хоттингера – аминный азот (230 ± 10) мг %, рН (7,2 ± 0,1) – или мясопептонный агар (МПА), рН (7,2 ± 0,1). При определении содержания живых микробных клеток в вакцине ис- пользуют концевые химически чистые пипетки и пробирки со стерильной водой очищенной. Содержимое каждой из 3 ампул ресуспендируют в 1 мл стерильной во- ды очищенной, встряхивают до образования гомогенной взвеси. Содержимое каждой ампулы с помощью стерильных пипеток переносят в 3 стерильные колбы вместимостью 250 мл с 99 мл воды очищенной и фарфоровыми или стеклянными бусами и закрывают ватно-марлевыми пробками. Колбы поме- щают на шуттель-аппарат и выдерживают в течение 30 мин при температуре (20 ± 2) °С и скорости 50 покачиваний в минуту. Исходя из общей концентрации спор, определенной в камере Горяева, взвесь спор десятикратно разводят водой очищенной до содержания пример- но 1000 спор в 1 мл. Например, из взвеси спор, разведенной в колбе в 100 раз, делают 5 последовательных десятикратных разведений, используя для каж- дого разведения отдельную пипетку вместимостью 1 мл, и получают послед- нее разведение 10 -7 , в котором будет содержаться 1000 спор/мл. 5301