Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

Из разведения, содержащего около 1000 спор в 1 мл, высевают по 0,1 мл на 5 чашек Петри с питательной средой, равномерно распределяя матери- ал на поверхности среды стеклянным шпателем или методом покачивания. Чашки переворачивают и инкубируют при температуре (36 ± 1) °С в течение 24 – 36 ч, после чего подсчитывают количество вырос- ших колоний на каждой чашке Петри. Расчет концентрации живых спор (БК), выраженное количеством спор в 1 мл вакцины, проводят по формуле: БК = 2 ∙ ∙ 3 , где: 2 – коэффициент пересчета на 1 мл пробы; n – общее количество колоний, выросших на 15 чашках при высеве 0,5 мл каждой из 3 исследуемых проб; p – кратность разведения. Процентное содержание живых спор вычисляют по формуле: % живых спор = БК ОК ∙ 100 3. Иммуногенность для мор ких свинок. Индекс иммунитета должен быть не менее 10000 (отношение величины LD 50 заражающего тест-штамма B. anthracis 71/12 для иммунизированных животных к величине LD 50 для не- иммунизированных животных). Иммунизируют испытуемой вакциной 20 морских свинок обоего пола массой (275 ± 25) г однократно подкожно в область внутренней поверхности бедра в дозе 50 млн спор в объеме 0,5 мл. Одновременно 20 контрольным морским свинкам вводят по 0,5 мл стерильного 0,9 % раствора натрия хлори- да. Через 21 сут иммунизированных и неиммунизированных животных под- кожно инфицируют тест-штаммом B. anthracis 71/12. Для заражения иммуни- зированных животных используют дозы 10 6 ; 10 7 ; 10 8 и 10 9 , разведенные из общего количества спор; для неиммунизированных животных используют дозы 10 2 ; 10 3 ; 10 4 и 10 5 , также разведенные из общего количества спор тест- 5302