Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

Постановка РНГА (микрометод). Постановку РНГА проводят на 3 по- листироловых планшетах с круглодонными лунками. В 8 лунок 6 рядов каж- дого планшета вносят по 0,025 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. В первые лунки каждого ряда вносят по 0,025 мл следующих образцов: в 1 − 2 ряды − цельной пробы, в 3 − 4 ряды − разведение 1:3, в 5 − 6 ряды − разведение 1:7; и делают последовательные двукратные разведения до восьмой лунки (из восьмой лунки 0,025 мл удаляют в емкость с дезинфицирующим раствором), получая разведения: в 1 − 2 рядах – от 1:2 до 1:256, в 3 − 4 рядах − от 1:6 до 1:768, в 5 − 6 рядах − от 1:14 до 1:1792. После этого в лунки всех рядов до- бавляют по 0,025 мл 50 % взвеси формалинизированных эритроцитов барана, разведенных в 50 раз. Содержимое лунок перемешивают покачиванием планшетов, оставляют на 15 мин при температуре (20 ± 2) °С и затем во все лунки вносят по 0,05 мл сыворотки холерной О1 агглютинирующей адсорби- рованной в разведении 1:2. Планшеты оставляют при температуре (20 ± 2) °С в течение 24 ч. Постановка контроля формалинизированных эритроцитов барана. В контрольную лунку вносят 0,025 мл взвеси разведенных в 50 раз эритроцитов барана и добавляют 0,075 мл 0,9 % раствора натрия хлорида. Учет результатов РНГА . Результат считают положительным при нали- чии гемагглютинации (эритроциты выпадают на дно лунки равномерным слоем в виде «зонтика», занимая не менее 2/3 сферической поверхности лун- ки; в ряде случаев может наблюдаться фестончатое оплывание краев агглю- тината). Результат считают отрицательным при отсутствии гемагглютинации (эритроциты выпадают на дно лунки в виде темно–коричневой полусферы или узкого колечка с ровным краем – «пуговки»). В контрольных лунках ре- зультат должен быть отрицательным. Последние лунки ряда, в которых наблюдается положительная ге- магглютинация, учитывают как показатели титров в РНГА, определяющие 5334