Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

- хроматографическая колонка длиной 0,25 м, диаметр 4,6 мм, непо- движная фаза силикагель нитрильный (10 мкм); - подвижная фаза – изоамиловый спирт – гексан (1,69 : 98,4); - скорость потока подвижной фазы 1,1 мл/мин; - температура колонки – 25 ° С. 350 мкл раствора сравнения вводят в инжектор хроматографа. Элюат начинают собирать за 2 мин до наступления и в течение 2 мин после наступ- ления времени удерживания холекальциферола в пробирку с притертой пробкой, содержащую бутилгидрокситолуола в гексане. Процедуру повто- ряют с испытуемыми растворами 1 и 2. Из каждой пробирки удаляют раство- ритель током азота при температуре не выше 30 ° С. Каждый из полученных остатков растворяют в 1,5 мл ацетонитрила. Условия хроматографирования : - жидкостной хроматограф с УФ-детектором; - аналитическая длина волны – 265 нм; - хроматографическая колонка длиной 0,15 м, диаметр 4,6 мм, непо- движная фаза силикагель октадецилсилильный для хроматографии (5 мкм); - подвижная фаза – ацетонитрил (для ВЭЖХ) – фосфорная кислота концентрированная (99,8 : 0,2); - скорость потока подвижной фазы 1,0 мл/мин; - температура колонки – 25 ° С. Проверка пригодности хроматографической системы . Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия: - относительное стандартное отклонение площади пика колекальцифе- рола на хроматограмме раствора сравнения не должно превышать 5 %; - эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику колекальциферола, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок; - фактор асимметрии пика колекальциферола должен составлять от 0,7 до 1,5. В инжектор хроматографа вводят не более 50 мкл каждого из трех рас- творов, полученных в результате очистки, и хроматографируют в указанных 6758