Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

белых мышей, разводят до концентрации 10 3 м.к./мл. По 0,1 мл взвеси с кон- центрацией 10 3 м.к./мл (100 м.к.) высевают на 3 чашки Петри с одной из вы- шеперечисленных питательных сред и инкубируют при температуре (27 ± 1) о С в течение 48 ч. Количество выросших колоний на чашках учитывают при вычислении ЕD 50 испытуемой серии. Подкожное заражение морских свинок проводят во внутреннюю по- верхность правого бедра на 21 сут, мышей – в ту же область на 7 или 21 сут после иммунизации. Заражающая доза для иммунизированных вакциной жи- вотных составляет 200 Dcl (Dosis certa letalis = LD 100 ) вирулентного штамма чумного микроба, 1 Dcl которого не должна превышать 100 микробных кле- ток. Подготовка заражающего штамма Y. pestis 231 должна быть указана в нормативной документации. Для заражения неиммунизированных (контрольных) животных исполь- зуют взвесь с концентрацией 50 м.к./мл в объеме 0,5 мл для морских свинок и 125 м.к./мл в объеме 0,2 мл для белых мышей, что соответствует 1 Dcl. Для определения фактического содержания микробных клеток заража- ющего штамма по 0,1 мл взвеси культуры Y. pestis 231, содержащей 10 3 м.к./мл, высевают на 3 чашки Петри с агаром Хоттингера и равномерно рас- пределяют по всей поверхности среды методом «обкатки» чашек. Посевы инкубируют при температуре (27 ± 1) ºС в течение 48 ч, после чего подсчи- тывают количество выросших колоний. Наблюдение за зараженными животными ведут в течение 20 сут. Все контрольные животные должны погибнуть от чумы в течение 10 сут. Погиб- ших животных вскрывают, берут органы и ткани (у морских свинок берут пробы из места введения, регионарных паховых лимфатических узлов, пече- ни, селезенки, легких, верхушки сердца; у белых мышей – из селезенки), вы- севая их методом отпечатков на чашки Петри с агаром Хоттингера с добав- лением генцианвиолета и с агаром Хоттингера - с натрием сернистокислым. 5348