Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

Количество пассажей полностью охарактеризованного главного посев- ного вирусного материала для получения рабочего посевного вирусного ма- териала, используемого для производства вакцины, не должно превышать 5. Рабочий посевной вирусный материал должен отвечать следую- щим требованиям: Подлинность. Производственный штамм вируса бешенства должен нейтрализоваться иммуноглобулином антирабическим из сыворотки крови лошади и не должен нейтрализоваться сывороткой крови крупного рогатого скота нормальной. Индекс нейтрализации – не менее 100. Для испытания параллельно готовят 2 ряда разведений вируса в диапа- зоне (1:5) − (1:50000) с кратностью разведения 10. В качестве среды разведе- ния используют 2 % раствор сыворотки крови лошади нормальной, приго- товленный с применением стерильной воды очищенной или воды для инъек- ций. Сыворотку крови лошади нормальную предварительно инактивируют при температуре 56 о С в течение 30 мин. Для получения разведений вируса в первую пробирку каждого ряда, соответствующую разведению 1:5, вносят 0,4 мл среды разведения, в остальные пробирки ряда– по 0,45 мл среды раз- ведения. В первую пробирку каждого ряда добавляют по 0,1 мл восстанов- ленной суспензии вируса бешенства штамм «Внуково-32» и тщательно пере- мешивают содержимое пробирок. Далее готовят ряд последовательных раз- ведений путем переноса 0,05 мл смеси из предыдущей пробирки в следую- щую пробирку, каждый раз используя новую пипетку. Из последней пробир- ки, соответствующей разведению 1:50000, удаляют 0,05 мл смеси. В резуль- тате конечный объем содержимого каждой пробирки составит 0,45 мл смеси. В каждую пробирку первого ряда вносят по 0,45 мл иммуноглобулина антирабического из сыворотки крови лошади, в каждую пробирку второго ряда –по 0,45 мл сыворотки крови крупного рогатого скота нормальной, инактивированной при температуре 56 °С в течение 30 мин. В результате по- лучают 2 ряда разведений вируса бешенства штамм «Внуково-32» в диапа- зоне от 10 -1 до 10 -5 . Содержимое пробирок осторожно перемешивают путем 5368