Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

фатном буферном растворе, начиная с 1:10 до 1:1280. В каждую лунку вносят по 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов. Содержимое лунок перемешивают встряхиванием планшеты и оставляют при температуре (20 ± 2) ° С на 40–45 мин (до оседания эритроцитов в контроле). Реакцию оценивают по «четырехкрестовой» системе. За титр антигена, или одну агглютинирующую единицу (АЕ), принимают наибольшее разведе- ние антигена, дающее четко выраженную агглютинацию эритроцитов (+++ или ++++). Определение титра антигена сопровождается отрицательным контро- лем на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. С этой целью в контрольную лунку того же плексигласового планшета вносят 0,4 мл фос- фатного буферного раствора и 0,4 мл 1 % суспензии эритроцитов. При отсут- ствии спонтанной агглютинации на дне лунки выпадает гомогенный с ров- ными краями осадок эритроцитов (отрицательная реакция). 3. Приготовление рабочей дозы антигена . В РТГА рабочей дозой анти- гена является то разведение антигена, в 0,2 мл которого содержится 4 агглю- тинирующие единицы (4 АЕ). Для ее вычисления следует установленную ве- личину титра антигена разделить на 8. Полученная от деления цифра указы- вает во сколько раз нужно развести антиген, чтобы в 0,2 мл его содержалось 4 АЕ (рабочая доза). Перед постановкой основного опыта проверяют точность приготовле- ния рабочей дозы (4 АЕ). Для этого в пять лунок горизонтального ряда плек- сигласового планшета, начиная со второй, вносят по 0,2 мл фосфатного бу- ферного раствора. В 1-ю и 2-ю лунки добавляют по 0,2 мл приготовленной рабочей дозы антигена. После перемешивания переносят 0,2 мл смеси из лунки в лунку, начиная со 2-й по 5-ю лунку, из 5-й лунки 0,2 мл удаляют. Затем в каждую лунку добавляют по 0,2 мл фосфатного буферного раствора и по 0,4 мл 1 % суспензии куриных эритроцитов. В 6-й лунке ставят контроль на отсутствие спонтанной агглютинации эритроцитов. После встряхивания смесь оставляют при температуре (20 ± 2) ° С на 40–45 мин (до оседания 5391