Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

Содержание вирусного антигена должно быть не менее 320 ИФА единиц в 1 дозе вакцины для взрослых и не менее 160 ИФА единиц в 1 дозе вакцины для детей; определение проводят методом ИФА с использованием коммерческих тест-систем для выявления антигена ВГА. Определение содержания антигена ВГА в вакцине проводят параллельно с определением содержания антигена в стандартном образце (СО) вакцины. Отношение содержания АГ ВГА в 1 дозе вакцины к содержанию АГ ВГА в СО должно находиться в пределах от 0,66 до 1,66 при статистической обработке результатов методом параллельных линий. Постановку контроля осуществляют в соответствии с инструкцией по применению используемой тест-системы. Перед постановкой ИФА проводят предварительную десорбцию АГ ВГА с алюминием гидроксида, центрифугируя 1000 мкл испытуемого образ- ца вакцины и СО при 6000 об/мин в течение 5 мин при комнатной темпера- туре. Из 900 мкл надосадочной жидкости готовят ряд последовательных дву- кратных разведений от 1:2 до 1:4 и осуществляют постановку ИФА с опреде- лением титра АГ ВГА в надосадочной жидкости (расчет N 1 ). Осадок растворяют в 900 мкл буферного раствора для десорбции, тща- тельно перемешивают и оставляют на ночь при температуре от 2 до 8 °С. За- тем центрифугируют при 6000 об/мин в течение 5 мин при комнатной темпе- ратуре. Из надосадочной жидкости готовят ряд последовательных двукрат- ных разведений от 1:2 до 1:64 и определяют титр АГ ВГА методом ИФА (расчет N 2 ). Расчет N 1 и N 2 осуществляют по формуле: N =( Т ∙ V 1 ) V 2 , где N – расчетное количество ИФА единиц в 1 мл готовой формы вакцины; Т – обратная величина титра антигена ВГА в ИФА; V 1 – объем 1 дозы вакцины, мкл; V 2 – объем исследуемого образца в ИФА, мкл. 5422