Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

использовать то же разведение неиммунной кроличьей сыворотки, что и им- мунной. Смеси вирус-сыворотка выдерживают при температуре 37 +1 °С в те- чение 1 ч. Постановка реакции нейтрализации. Используют одну из указанных выше культур клеток. Перед внесением на монослой культуры клеток смеси ви- рус − сыворотка, ростовую среду сливают и монослой промывают один раз раствором Эрла. Смесь вирус-сыворотка вносят в объёме 0,2 мл в каждые 3 флакона с ФЭК или в каждые 3 лунки планшетов с клетками PS или Vero . Флаконы с ФЭК или планшеты с PS или Vero помещают в термостат при температуре 36+1 °С на 2 ч., периодически обкатывают монослой кле- ток смесью вирус – сыворотка путем покачивания флаконов или планшетов через каждые 15 – 20 мин. После адсорбции вируса, на клеточный монослой наносят питательный агар, пригодный для данной культуры клеток. Учёт результатов. Учёт результатов проводят на 5 сут при титровании в культуре клеток ФЭК или PS, или на 6–7 сут при титровании вируса в куль- туре клеток Vero . Подсчитывают количество бляшек отдельно в каждой лун- ке или флаконе. Затем вычисляют среднее количество бляшек из 3 лунок планшета или 3 флаконов, соответственно для каждого разведения вируса. Титр вируса с иммунной и не иммунной сыворотками подсчитывают, как описано в разделе «Специфическая активность» и выражают в десятичных логарифмах БОЕ (бляшкообразующих единиц). Индекс нейтрализации (подлинность вируса желтой лихорадки) пред- ставляет собой разницу lg титров вируса с не иммунной сывороткой и им- мунной сывороткой и должен быть не менее 1,0 lg. 5430