Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

одной из боковых сторон культурального флакона и выращивают при темпе- ратуре (37±1) °С. Клеточный монослой формируется на 3 − 4 сут. Титрование проводят в 96-луночных панелях для культивирования кле- ток. Содержание каждого типа вируса определяют в реакции нейтрализации путем нейтрализации другого типа вируса соответствующей гомотипичной диагностической энтеровирусной моновалентной сывороткой. Рабочее разведение гомотипичной сыворотки к каждому из двух типов полиовирусной вакцины должно снижать титр вируса не менее, чем на 2 lg (не менее, чем в 100 раз). В каждое испытание наряду с исследуемым образ- цом включают одновременное титрование СО вакцины. Разведения вакцины и СО готовят на питательной среде Игла МЕМ, содержащей 2 % сыворотки крови плодов коров кратностью 1:5. Диапазон разведений должен включать по меньшей мере три разведения препаратов, при которых вирус разрушает от 10 % до 90 % зараженных клеток. В каждую лунку панели вносят 0,05 мл выбранных разведений вакцины (тип 1 или тип 3) или СО и 0,05 мл рабочего разведения нейтрализующей сыворотки к другому типу вируса (по 8 − 12 лу- нок на разведение) и инкубируют 3 ч при температуре (37±1) °С. Затем во все лунки панелей при титровании двухвалентной вакцины добавляют по 0,1 мл взвеси клеток в концентрации 100000 − 200000 клеток в мл. В контрольные лунки вносят по 0,1 мл клеточной суспензии и 0,1 мл питательной среды. Па- нели инкубируют в термостате при температуре (37±1) °С в газовой среде, содержащей 5 % СО 2 , в течение 7 сут. Клетки Нер-2 в лунках панели про- сматривают в инвертированном микроскопе на наличие цитопатогенного действия вирусов на 3, 5 и 7 дни инкубирования. ТЦД 50 /мл вируса высчиты- вают на 7 сут по методу Рида и Менча. Так как разведения вируса, взятые в опыт по определению титра в двухвалентной вакцине, разводятся в два раза нейтрализующей сывороткой, значение титра 10-дозовой вакцины (0,2 мл/доза) должен быть увеличен на 0,6 lg. Титрование каждой серии полиомиелитной вакцины проводят не ме- 5630