Фармакопея. Издание XIV. Том IV. Биологические лекарственные препараты, Растительные средства и препараты, Гомеопатические фармацевтические субстанции

ния проводят на 5 здоровых белых мышах массой тела 18-20 г и двух морских свинках массой тела 250-300 г. Тест-доза для белых мышей составляет 0,5 мл (внутрибрюшинно), для морских свинок – 5,0 мл (подкожно в оба бока по 2,5 мл). Период наблюдения за животными составляет 7 сут. Специфическая активность. Препарат должен давать положительную реакцию диффузной преципитации (РДП) с сибиреязвенным цитоплазматиче- ским антигеном (ЦПА) в разведении не менее 1:60. Должен защищать от гибели не менее 4 из 6 морских свинок при введении им 50 LD 50 штамма В. аnthracis 71/12. 1. Активность в РДП с сибиреязвенным ЦПА. Приготовление сибиреязвенного ЦПА . В бульон Хоттингера рН 7,2 ± 0,1 высевают споровую культуру штамма В. аnthracis СТИ-1 из расчета не менее 20 млн живых спор в 1 мл (определение проводят в соответствии с ОФС «Опреде- ление концентрации микробных клеток») и инкубируют в термостате при тем- пературе (37 ± 1) ºС в течение (21 ± 3) ч. В бульоне должен наблюдаться рост культуры у дна пробирки в виде ватных хлопьев и взвешенных комков, не дол- жен вызывать помутнения среды. Полученную бульонную культуру по (9 ± 1) мл высевают на один матрац с 3 % агаром Хоттингера рН 7,2 ± 0,1 с аминным азо- том (2,2 ± 0,2) %. Покачиванием матраца поверхность агара равномерно увлаж- няют бульонной культурой. Матрацы в вертикальном положении инкубируют в термостате при температуре (35,5 ± 0,5) ºС в течение 24 ч. Затем из матрацев удаляют остатки бульонной культуры и конденсата. Агаровую культуру смы- вают 50 мл 0,9 % раствором натрия хлорида. Надосадочную жидкость удаляют, осадок ресуспендируют стерильным 12 % раствором натрия хлорида до кон- центрации (8,5 ± 0,5) млрд клеток в 1 мл суспензии. Полученную суспензию вы- держивают при температуре (21 ± 1) ºС в течение 10 сут при периодическом пе- ремешивании. Для консервации к суспензии бактерий добавляют тиомерсал в концентрации 1:20000. Через 10 сут суспензию центрифугируют при 1000 g в течение 20 мин и надосадочную жидкость используют в качестве антигена. 5805